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强RIPA裂解液图片
产品货号:
BTN131006
中文名称:
强RIPA裂解液
英文名称:
RIPA Lysis Buffer(Strong)
产品规格:
250mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本制品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本制品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。




产品选择我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
产品名称强RIPA裂解液中RIPA裂解液弱RIPA裂解液
有效裂解成分1% Triton X-100,
1% deoxycholate,
0.1% SDS
1% NP-40,
0.5% deoxycholate,
0.1% SDS
1% NP-40,
0.25% deoxycholate
裂解强度温和
对膜蛋白的提取很好较好一般
对胞浆蛋白的提取很好很好很好
对核蛋白的提取很好较好较好
胞浆磷酸化蛋白提取很好很好很好
细胞核转录因子提取很好很好很好
含蛋白酶抑制剂
含磷酸酯酶抑制剂
主要用途WB,IPWB,IPWB,IP,co-IP



组分规格
强RIPA裂解液250mL
说明书1份

保存:2~8℃,有效期1年。


  • 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
  • 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
  • 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。



  • 对于培养细胞样品:
    • 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
    • 裂解细胞
      • 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2秒后,细胞就会被裂解。
      • 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150~250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。
    • 充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
      • 通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μL或250μL。
  • 对于组织样品:
    • 把组织剪切成细小的碎片。
    • 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
    • 按照每20毫克组织加入150~250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
    • 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
    • 充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    • 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
      • RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

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